定量PCR和數(shù)字PCR，然后就遇到各種PCR技術(shù)，PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR和ddPCR，有幾個(gè)長得好像，怎么區(qū)分呢？今天一舉搞定它。
01、普通PCR
PCR是普通PCR，以雙鏈DNA為模板，以dNTP為底物，特異性地?cái)U(kuò)增雙鏈DNA。然后采用瓊脂糖凝膠電泳對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行檢測，只能做定性分析。
02、實(shí)時(shí)熒光定量PCR
qPCR和Real-time PCR是實(shí)時(shí)熒光定量PCR，以cDNA為模板，以dNTP為底物，對(duì)擴(kuò)增出的DNA進(jìn)行定量分析。實(shí)時(shí)熒光定量PCR常用的方法：水解探針法和熒光染料法。
03、逆轉(zhuǎn)錄PCR
RT-PCR 是逆轉(zhuǎn)錄PCR，采用 Oligo（dT） 或隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成 cDNA，再以 cDNA 為模板進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，結(jié)果只能定性，不能定量。
04、實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR
RT-qPCR是實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR，是qPCR+RT-PCR的組合，將總RNA或mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA后再作為模板，以dNTP為底物，進(jìn)行qPCR的定量分析。
05、數(shù)字PCR
dPCR是數(shù)字PCR即三代PCR，是一種能夠?qū)崿F(xiàn)核酸定量的檢測技術(shù)，基于泊松分布原理將核酸樣品分配到大量立、平行的微反應(yīng)單元（納升級(jí)）中，使每個(gè)反應(yīng)室中平均只有一個(gè)拷貝或者沒有目標(biāo)DNA分子，然后加入熒光信號(hào)進(jìn)行擴(kuò)增，從而實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)核酸分子的計(jì)數(shù)，提高檢測靈敏度和準(zhǔn)確度。
Q
各種PCR的全稱
A:
① 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）
②實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR，qPCR）
③ 逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）
④實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR（Real-time RT-PCR，RT-qPCR）
數(shù)字PCR（Digital PCR，Dig-PCR，dPCR）

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