供應(yīng)商 | 上海聯(lián)祖生物科技有限公司 店鋪 |
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認(rèn)證 | |
報(bào)價(jià) | 人民幣 4490.00元每盒 |
關(guān)鍵詞 | 熒光定量PCR試劑盒,有輪瑞氏絳蟲(chóng)PCR,有輪瑞氏絳蟲(chóng)試劑 |
所在地 | 上海市嘉定區(qū)嘉羅公路1661 |
2年
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品名稱(chēng):有輪瑞氏絳蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
英文名稱(chēng):Raillietina cesticillus
產(chǎn)品貨號(hào):LZ-P3971
規(guī)格:50T
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光。
有效期:一年
如何進(jìn)行 PCR 實(shí)驗(yàn)?
一、準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料(1)DNA模板:包含你想要復(fù)制的DNA區(qū)域。上海(2)引物:短的單鏈DNA片段,用于指導(dǎo)DNA合成的起始位置。(3)DNA聚合酶:一種酶,用于合成DNA。(4)四種脫氧核苷酸(dNTPs):DNA的構(gòu)建塊。(5)緩沖液:提供適宜的反應(yīng)環(huán)境。(6)鎂離子或其它必需的離子:通常作為DNA聚合酶的輔助因子。二、設(shè)定反應(yīng)混合物將所有材料混合在微量離心管中。混合物的總體積通常在20-50微升之間。
3. PCR程序(1)將混合物放入PCR機(jī)(熱循環(huán)儀)中,并設(shè)定程序。PCR程序通常包括以下階段:(2)初次變性:加熱至94-98°C,持續(xù)幾分鐘,使DNA雙鏈解開(kāi)成單鏈。(3)循環(huán)步驟(通常進(jìn)行30-40次循環(huán)):(4)變性階段:加熱至94-98°C,持續(xù)20-30秒,使DNA雙鏈解開(kāi)。(5)退火階段:降溫至50-65°C,持續(xù)20-40秒,允許引物與模板DNA結(jié)合。(6)延伸階段:加熱至72°C,持續(xù)1分鐘每1千個(gè)堿基,以便DNA聚合酶合成新的DNA鏈。(7)后延伸:在72°C下持續(xù)5-10分鐘,確保所有可用的DNA模板都被復(fù)制。(8)保持階段:將溫度降至4-15°C,直到用戶(hù)準(zhǔn)備取出樣品。
實(shí)驗(yàn)步驟:
一.有輪瑞氏絳蟲(chóng)PCR樣品制備
1.PCR擴(kuò)增并檢測(cè)。根據(jù)不同的引物挑選適合的退火溫度進(jìn)行PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物用2-2.5%的瓊脂糖膠跑水平電泳檢測(cè),上樣量3-5ul。PCR產(chǎn)物為10ng/nl左右為佳。
2.PCR產(chǎn)物與變性buffer混合。在干凈的PCR管底部加入5ul SSCP上樣緩沖液(變性緩沖液,同《分子克隆》中的測(cè)序緩沖液),然后在緩沖液中央加入PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。按照經(jīng)驗(yàn),擴(kuò)增效果在瓊脂糖膠上能看出比較亮的帶的樣品加1ul,效果很好加0.5ul,如果不太好就適當(dāng)增加1.5、2或3不等,同時(shí)加大上樣緩沖液的量,比如加3ul的PCR產(chǎn)物,緩沖液加到8ul變性效果更好。
3.PCR產(chǎn)物變性。加好的樣品進(jìn)行離心,使樣品集中在管底。PCR儀上95℃變性10分鐘,立即取出PCR產(chǎn)物連同架子一同置于冰上靜置5min,以免變性的產(chǎn)物復(fù)性。
PCR實(shí)驗(yàn)的基本步驟:
有輪瑞氏絳蟲(chóng)試劑DNA聚合酶是實(shí)驗(yàn)室中常用的生物學(xué)酶之一,在PCR實(shí)驗(yàn)中具有重要的作用。實(shí)驗(yàn)室常用的DNA聚合酶,包括Taq聚合酶、Pfu聚合酶和Tth聚合酶。
一、Taq聚合酶:
Taq聚合酶是由Thermus aquaticus細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶,在分子生物學(xué)研究中得到廣泛應(yīng)用。Taq聚合酶具有熱穩(wěn)定性,可以在高溫條件下保持活性,這是由于其來(lái)源于熱液生物,能夠存活和正常活動(dòng)于高溫環(huán)境。這使得Taq聚合酶在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)中起到關(guān)鍵的作用。Taq聚合酶能夠按照DNA模板合成新的DNA鏈,因此在PCR中用于擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段。然而,Taq聚合酶缺乏3'-5'外切酶活性,導(dǎo)致其生成的PCR產(chǎn)物末端容易出現(xiàn)額外的腺嘌呤堿基。因此,在某些應(yīng)用中,需要使用具有外切酶活性的聚合酶。
二、Pfu聚合酶:
Pfu聚合酶是由Pyrococcus furiosus細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶相比,Pfu聚合酶具有更高的熱穩(wěn)定性和耐酶性。這使得Pfu聚合酶在高溫PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色,其高度穩(wěn)定的酶活性能夠確保PCR反應(yīng)的可靠性和準(zhǔn)確性。此外,Pfu聚合酶還具有3'-5'外切酶活性,可以修復(fù)并糾正PCR反應(yīng)中的腺嘌呤堿基誤配,有效防止誤差累積。因此,Pfu聚合酶適用于需要高度準(zhǔn)確的PCR擴(kuò)增和DNA測(cè)序。
三、Tth聚合酶:
Tth聚合酶是由Thermus thermophilus HB8細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶和Pfu聚合酶不同,Tth聚合酶具有熱活性反轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄酶活性,可以將RNA模板合成相應(yīng)的DNA鏈。因此,Tth聚合酶在逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)中得到廣泛應(yīng)用,用于將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA,并通過(guò)增加熱活性酶來(lái)實(shí)現(xiàn)PCR擴(kuò)增。此外,Tth聚合酶還具有一定的外切酶活性,可用于修復(fù)和校正PCR產(chǎn)物的末端。
線(xiàn)粒體外膜功能檢測(cè)試劑盒
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細(xì)胞結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
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組織鈣調(diào)神經(jīng)酸酶(CALCINEURIN;PP2B)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒
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酵母菌YNBA培養(yǎng)基
食物D-葡萄糖酸鹽比色法定量檢測(cè)試劑盒
0酸化非受體酪酸激酶c-Abl抗體
防御素α1/3抗體
9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框7抗體
鈣反應(yīng)因子抗體
羧肽酶CPN2抗體
組織蛋白酶C抗體
接頭蛋白DOK7抗體
纖維蛋白肽B抗體(血纖肽B)
GARNL3蛋白抗體
G蛋白偶聯(lián)受體30抗體
有輪瑞氏絳蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒組蛋白去乙酰化酶8抗體
大鼠趨化因子(C-X-C基序)配體1(CXCL1)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名:大鼠趨化因子,CXCL1抗體,單克隆抗體
豬腫瘤壞死因子α(TNFa)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名:豬腫瘤壞死因子α,TNFa抗體,單克隆抗體
大鼠離子化鈣結(jié)合適配分子1(IBA1)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名:大鼠離子化鈣結(jié)合,IBA1抗體,單克隆抗體
綿羊腫瘤壞死因子α(TNFa)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名:綿羊腫瘤壞死因子,TNFa抗體,單克隆抗體
大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名:大鼠紅細(xì)胞生成素,EPO抗體,單克隆抗體
人趨化素(CHEM)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名:人趨化素(,CHEM抗體,單克隆抗體
大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名:大鼠腦源性神經(jīng),BDNF抗體,單克隆抗體
豬堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF2)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名:豬堿性成纖維細(xì)胞,FGF2抗體,單克隆抗體