兔冠狀動脈平滑肌細胞
基本屬性:
細胞名稱:兔冠狀動脈平滑肌細胞
組織來源:心臟
商品貨號:LZ-YX10309
種屬來源:兔
產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
細胞簡介:
冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。冠狀動脈疾病發生和發展的一個主要因素是由于血管平滑肌細胞轉變成為了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌細胞能表達鈣離子通道,ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表達可能是造成血管壁炎癥反應,并進一步造成血管疾病的原因 。因此,對冠狀動脈血管平滑肌細胞的體外培養和研究可用來發現和確定新的冠狀血管疾病的靶向治療方法。
培養基:原代平滑肌細胞培養體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:長梭形細胞,不規則細胞
傳代特性:根據細胞特性
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
使用方法:
兔冠狀動脈平滑肌細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈長梭形細胞,不規則細胞,在技術部標準操作流程下,根據細胞特性,建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶,用75%消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4)待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內加入5ml完全培養基終止消化;
3)經1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml完全培養基(補加1%FBS,促進貼壁)重懸沉淀,接種于新的培養瓶內;
4)待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基(37℃預熱)。
原代細胞試用的實驗類型:
上海前面我們了解了原代細胞獲取和培養過程中應該注意的一些細節,這有助于我們培養我們的原代細胞。那么原代細胞培養好后,它可適用哪些研究呢?
原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的生物醫藥產業如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。在這些應用中幾乎都涉及了幾個常見的且基礎的細胞實驗,如下:
一、細胞增殖檢測:
兔冠狀動脈平滑肌規格常見檢測方法:CCK8檢測法 ,MTT檢測法,Brdu檢測法,Edu檢測法,平板克隆形成
二、細胞周期檢測
常見檢測方法:流式檢測細胞周期,標記有絲分裂百分率法
三、細胞凋亡檢測
兔冠狀動脈平滑肌品牌常見檢測方法:流式檢測細胞凋亡,線粒體膜電位,活性氧檢測,Hoechst染色,電鏡,TUNEL
四、細胞轉移能力檢測
常見檢測方法:細胞劃痕實驗,Transwell實驗,Invasion實驗
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