PCR檢測(cè)試劑盒有效期一般為1年，這是指在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存溫度下。核酸擴(kuò)增部分的試劑一般要貯存于-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部分試劑則貯存于2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。上海

產(chǎn)品名稱：蜈蚣探針?lè)≒CR鑒定試劑盒

英文名稱：Scolopendra

產(chǎn)品貨號(hào)：LZ-P2849

分類：PCR檢測(cè)試劑盒

儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

【結(jié)果分析條件設(shè)定】

u 基線（Baseline）設(shè)定：應(yīng)選擇該次實(shí)驗(yàn)指數(shù)擴(kuò)增前所有樣本熒光信號(hào)比較穩(wěn)定的一段區(qū)域（所有樣本熒光信號(hào)無(wú)較大波動(dòng)），起始點(diǎn)（Start）應(yīng)避開熒光采集起始階段的信號(hào)波動(dòng)，終止點(diǎn)（End）應(yīng)比早出現(xiàn)指數(shù)擴(kuò)增的樣本Ct值減少1~3個(gè)循環(huán)，建議基線設(shè)為6~15。

u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值線設(shè)定在剛好超過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲線的高點(diǎn)。

【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】

1.蜈蚣探針?lè)≒CR  陰性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陰性，無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct；

2.   陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性，有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小于等于35；

3.   以上要求需在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。

【結(jié)果判斷】

1.  陽(yáng)性：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且Ct＜38；

2.可疑：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本；對(duì)于可疑樣本建議復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期，則判定為陽(yáng)性，否則判定為陰性；

3.   陰性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰性樣本。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

　　　①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

　　　②堿基配對(duì)原則；

　　　③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

　　　④靶基因的特異性與保守性。

蜈蚣探針?lè)ㄔ噭┖衅渲幸锱c模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡(jiǎn)便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。

(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR檢測(cè)步驟:

1、樣品處理

1）按照GB 4789.10-2016（或SN/T 1870-2016），取樣品25g（mL），加入到含有225mL 7.5% NaCl肉湯的無(wú)菌容器中均質(zhì)，調(diào)節(jié)pH至6.8±0.2。

2）36±1℃培養(yǎng)18-24h。

注：也可參考其他地方標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行樣品的前處理。

2、核酸提取

1）取40μL增菌液于裂解液管中，98℃或沸水浴10min。

2）冷卻至室溫，吸取上清備用或者置于-20℃保存。

3、反應(yīng)體系配置

從試劑盒中取出SA預(yù)混液，充分融化，短暫離心，然后將陰性對(duì)照、樣品的DNA提取液、陽(yáng)性對(duì)照各取5μL分別加入PCR管中，蓋好管蓋，短暫離心，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。

4、PCR擴(kuò)增

PCR管置于PCR儀上，推薦反應(yīng)程序設(shè)定如下：反應(yīng)體系為25μL，在第二步每個(gè)循環(huán)60℃時(shí)檢測(cè)熒光信號(hào)，檢測(cè)通道選擇FAM。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠I型膠原蛋白(COL-1)ELISA

Rat deoxypyridinoline / deoxypyridinoline (DPD) ELISA Kit 大鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)PCR檢測(cè)試劑盒

HumanDihydrotestosterone,DHTELISAKit 人雙輕(DHT)PCR檢測(cè)試劑盒

HumanCollagenaseIPCR檢測(cè)試劑盒人膠原酶I(CollagenaseI)PCR檢測(cè)試劑盒

組織5-羥色胺-N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶(SerotoninN-Acetylansferase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)PCR檢測(cè)試劑盒

人抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA

小鼠金屬硫蛋白1(MT-1)試劑盒 Mouse Metallothionein-1,MT-1 ELISA Kit

硬骨素(SOST)PCR檢測(cè)試劑盒 ， SOST ELISA Kit

MonkeyIerleukin6,IL-6PCR檢測(cè)試劑盒猴白介素6(IL-6)PCR檢測(cè)試劑盒

ELISAKitOFQ/N小鼠孤腓肽規(guī)格：48T/96T

HumanAcidPhosphatase，ACPELISAKit人酸性0酸酶(ACP)PCR檢測(cè)試劑盒

蜈蚣探針?lè)≒CR鑒定試劑盒P-PKC ELISA Kit 大鼠0酸化蛋白激酶CMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-TNF-alpha 壞死因子-α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Glucose 6 phosphatase alpha 葡萄糖60酸酶α抗體 規(guī)格 0.2ml

LHRH ELISA Kit 大鼠黃體生成素釋放激素 96T

phospho-NDEL1(Thr219) 英文名稱： 0酸化中心粒蛋白Nudel抗體 0.1ml

AU5 tag 英文名稱： AU5 tag標(biāo)簽抗體 0.1ml

Anti-TNF-alpha 壞死因子-α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

• 

  大鼠趨化因子(C-X-C基序)配體1(CXCL1)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：大鼠趨化因子,CXCL1抗體,單克隆抗體

• 

  豬腫瘤壞死因子α(TNFa)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：豬腫瘤壞死因子α,TNFa抗體,單克隆抗體

• 

  大鼠離子化鈣結(jié)合適配分子1(IBA1)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：大鼠離子化鈣結(jié)合,IBA1抗體,單克隆抗體

• 

  綿羊腫瘤壞死因子α(TNFa)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：綿羊腫瘤壞死因子,TNFa抗體,單克隆抗體

• 

  大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：大鼠紅細(xì)胞生成素,EPO抗體,單克隆抗體

• 

  人趨化素(CHEM)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：人趨化素(,CHEM抗體,單克隆抗體

• 

  大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：大鼠腦源性神經(jīng),BDNF抗體,單克隆抗體

• 

  豬堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF2)單克隆抗體

  3490元

  產(chǎn)品名：豬堿性成纖維細(xì)胞,FGF2抗體,單克隆抗體