脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)試劑盒紫外分光光度法說明書
紫外分光光度法 50管/48樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
商品屬性:
產品名稱:脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)試劑盒紫外分光光度法
貨號:LZ-S0144-A
規格 : 50管/48樣
測試方法:紫外分光光度法
產品分類:維生素C代謝系列
發貨地:上海
測定意義:
DHAR存在于線粒體、細胞質和葉綠體中。DHAR催化GSH還原DHA生成AsA,調控細胞AsA/DHA比值,是抗壞血酸-谷胱甘肽氧化還原循環的關鍵酶。提高植物體內的 DHAR 活性,可提高植物食品中AsA含量,進而提高植物食品的營養品質。
測定原理:
DHAR催化GSH還原DHA生成AsA,通過測定DHA被還原量可計算得DHAR活性。
實驗中所需儀器及設備
研缽、冰、低溫離心機、紫外分光光度計、1ml石英比色皿、可調式移液器、雙蒸水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體 50 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 35 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1 瓶(棕色),4℃保存。臨用前加入 5mL 蒸餾水充分溶解。
試劑四:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 5mL 蒸餾水充分溶解。
粗酶液提取:
1. 按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入
1mL 試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心 10min,取上清置冰上待測。
2. 細菌、真菌:按照細胞數量(10
4個):試劑一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議
500 萬細胞加入 1mL 試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,
總時間 3min);8000g 4℃離心 20min,取上清液置冰上混勻待測。
3. 血清等液體:直接測定
生化檢測試劑盒操作步驟:
一、?準備工具和環境?:確保操作臺面干凈、整潔,這是進行科學實驗的步。天津
?二、?仔細閱讀說明書?:這是使用試劑盒的基礎,說明書包含了所有必要的信息和操作指南。
三、樣本采集?:按照說明書的指導,正確采集樣本。不同類型的檢測可能需要不同類型的樣本,如血液、唾液或鼻涕等。
?四、樣本混合?:將樣本與試劑小心混合,注意輕柔操作,避免產生泡沫,以確保檢測的準確性。
?五、?等待反應?:混合后,耐心等待試劑盒的反應,這個時間可以用來進行其他活動,但不要著急,因為好的結果值得等待。
六、結果判讀?:時間到后,仔細判讀結果。試劑盒通常會有明確的指示,告訴你如何根據顯示的線條或顏色來判斷結果。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。
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