氧化型/脫氫抗壞血酸(DHA)含量試劑盒紫外分光光度法說明書
紫外分光光度法 50管/48樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
商品屬性:
產品名稱:氧化型/脫氫抗壞血酸(DHA)含量試劑盒紫外分光光度法
貨號:LZ-S0139-A
規格 : 50管/48樣
測試方法:紫外分光光度法
產品分類:維生素C代謝系列
發貨地:上海
測定意義:
AsA作為植物細胞一個重要生理指標,其AsA 的含量、氧化還原狀態(AsA/DHA 比率)及其合成與代謝相關酶類活性的變化涉及植物對一系列環境脅迫的響應。DHA是AsA的可逆的氧化型,在生物體內,與抗壞血酸共同組成氧化還原系統,具有電子受體的作用。
測定原理:
DTT能將DHA還原成AsA,通過測定體系中AsA的生成速率,即可計算出DHA含量。
實驗中所需儀器及設備
研缽、冰、低溫離心機、紫外分光光度計、1ml石英比色皿、可調式移液器、雙蒸水
試劑的組成和配制:
試劑一:液體 50 mL×1 瓶,室溫保存。
試劑二:液體 40 mL×1 瓶,室溫保存。
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 10mL 蒸餾水充分溶解。
標準品:粉劑×1 瓶, 4℃保存。臨用前加入 5.743 mL 蒸餾水充分溶解;吸取 0.1 mL 上述
溶液,加入 0.9 mL 蒸餾水,混勻,即為 100μmol/L DHA。
樣品中 DHA 提取:
1. 組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一)進行冰浴勻漿。12000g,4℃離心 20min,取上清置冰上待測。
2. 細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議500 萬細胞加入 1mL 試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);12000g,4℃離心 10min,取上清液置于冰上待測。
3. 血清等液體:直接測定。
生化檢測試劑盒操作步驟:
一、?準備工具和環境?:確保操作臺面干凈、整潔,這是進行科學實驗的步。
?二、?仔細閱讀說明書?:這是使用試劑盒的基礎,說明書包含了所有必要的信息和操作指南。
三、樣本采集?:按照說明書的指導,正確采集樣本。不同類型的檢測可能需要不同類型的樣本,如血液、唾液或鼻涕等。杭州
?四、樣本混合?:將樣本與試劑小心混合,注意輕柔操作,避免產生泡沫,以確保檢測的準確性。
?五、?等待反應?:混合后,耐心等待試劑盒的反應,這個時間可以用來進行其他活動,但不要著急,因為好的結果值得等待。
六、結果判讀?:時間到后,仔細判讀結果。試劑盒通常會有明確的指示,告訴你如何根據顯示的線條或顏色來判斷結果。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。
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