鳥氨酸轉氨酶（OAT）試劑盒紫外分光光度法說明書
紫外分光光度法 50管/48樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
商品屬性：
產品名稱：鳥氨酸轉氨酶（OAT）試劑盒紫外分光光度法
貨號：LZ-S01113-A
規格 : 50管/48樣
測試方法:紫外分光光度法
產品分類：氨基酸代謝系列
發貨地：上海
測定意義:
脯氨酸是植物體內適應逆境脅迫的一種重要的滲透調節物質。高等植物中脯氨酸代謝因其初始底物不同，分為谷氨酸( Glu) 和鳥氨酸( Orn) 兩條合成途徑。鳥氨酸轉氨酶( δ-OAT) 是 是以鳥氨酸為前體合成脯氨酸途徑的關鍵酶，對植物適應逆境脅迫起關鍵作用。
測定原理:
鳥氨酸和α-酮戊二酸在鳥氨酸轉氨酶和NADH作用下發生氨基轉移反應生成吡咯啉-5-羧酸（P5C），同時產生NAD，通過檢測340nm處的吸光度的變化可反映出鳥氨酸轉氨酶活性的高低。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、研缽、紫外可見分光光度計、1mL石英比色皿。
試劑的組成和配制:
提取液：液體 55mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 70 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加 20mL 試劑一充分溶解；用不完的試劑 4℃保存。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加 20mL 試劑一充分溶解；用不完的試劑 4℃保存。
試劑四：粉劑×2 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加 10mL 試劑一充分溶解；現配現用。
酶液提取
1. 組織：按照質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1mL提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于 4℃，10000g 離心 10min，取上清置冰上待測。
2. 細胞：按照細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500萬細胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 4℃，10000g 離心 10min，取上清置冰上待測。
3. 液體：直接檢測
生化檢測試劑盒操作步驟：
一、?準備工具和環境?：確保操作臺面干凈、整潔，這是進行科學實驗的步。
?二、?仔細閱讀說明書?：這是使用試劑盒的基礎，說明書包含了所有必要的信息和操作指南。
三、樣本采集?：按照說明書的指導，正確采集樣本。不同類型的檢測可能需要不同類型的樣本，如血液、唾液或鼻涕等。
?四、樣本混合?：將樣本與試劑小心混合，注意輕柔操作，避免產生泡沫，以確保檢測的準確性。
?五、?等待反應?：混合后，耐心等待試劑盒的反應，這個時間可以用來進行其他活動，但不要著急，因為好的結果值得等待。
六、結果判讀?：時間到后，仔細判讀結果。試劑盒通常會有明確的指示，告訴你如何根據顯示的線條或顏色來判斷結果。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。
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