山梨醇麥康凱瓊脂基礎(SMAC)
貨號:LZ-PYJ3562
英文名稱:Sorbitol Maconkey Agar Base
產品規格:250g
用途:
用于大腸桿菌O157的選擇性分離培養。
成分(g/L)
蛋白胨 17.0g
多價蛋白胨 3.0g
山梨醇 10.0g
牛膽鹽 1.5g
氯化鈉 5.0g
中性紅 0.03g
結晶紫 0.001g
瓊脂 13.5g
PH值 7.1±0.2
用 法
稱取本品50克,溶解于1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶,每瓶200ml,121℃高壓滅菌20分鐘,冷至45-50℃加入無菌0.5mg,噻孢0.01mg(或加入一支山梨醇麥康凱瓊脂添加劑),混勻,傾入無菌平皿,備用。
配制過程中的常見問題分析:
01 培養基顏色不正確
(1)含有酸堿指示劑的培養基,若顏色不正確,通常是由于pH不正確導致的,加熱過度、錯誤的滅菌方式等都會導致此項問題。
(2)加熱過度導致某些成分分解或糖焦化,如SC培養基(SC增菌液)加熱過度會變紅,含糖量高的培養基,加熱過度通常會出現顏色加深,呈焦糖色或棕褐色。
(3)某些成分變質,如血液久置易變黑,制成的平板顏色偏棕黑色。
02 培養基不凝固或凝固性差
(1)顆粒培養基稱量錯誤
(2)瓊脂分布不均勻
(3)培養基pH不正確
(4)培養基加熱過度
(5)瓊脂量不足
03 培養基產生沉淀
(1)某些培養基原本就含有不溶性沉淀,如TTB,MC培養基等,配方中含有大量不溶性碳酸鈣。
(2)滅菌前未充分溶解,若滅菌前溶解不充足,滅菌后就會出現大量沉淀。
(3)pH不正確,偏酸或偏堿都有可能使培養基中的部分金屬離子產生沉淀。
(4)水的純度不夠,天然水中含有較多的礦物鹽離子,若未除凈,則易與培養基中反應生成沉淀。
(5)添加劑加入溫度不正確,卵黃、血液等對溫度敏感的添加成分,若加入時溫度過高或溫差過大,易出現凝塊。
(6)稱量錯誤。
(7)試劑加入順序不正確。
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注意事項:
1)培養基盡量使用新鮮培養基,2~4h內用完;
2)上海應使用預還原培養基,預還原24~48h更好;
3)可采用預還原滅菌法制作的培養基(用前于培養基中加入還原劑,如L-半胱氨酸、維生素C等,盡可能使預還原劑處于還原狀態);
4)液體培養基應煮沸10min,以驅除溶解氧,并迅速冷卻,立即接種醫。學教育網搜集整理;
5)厭氧菌的培養基均應營養豐富,并加有還原劑與生長刺激因子(血清、維生素K、氯化血紅素、聚山梨酯-80等)。
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