產(chǎn)品介紹：
產(chǎn)品名稱：產(chǎn)氣腸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Enterobacter aerogenes
產(chǎn)品貨號：LZ-P3501
規(guī)格：50T
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光。
有效期：一年
如何進(jìn)行 PCR 實驗？
一、產(chǎn)氣腸桿菌PCR準(zhǔn)備實驗材料（1）DNA模板：包含你想要復(fù)制的DNA區(qū)域。上海（2）引物：短的單鏈DNA片段，用于指導(dǎo)DNA合成的起始位置。（3）DNA聚合酶：一種酶，用于合成DNA。（4）四種脫氧核苷酸（dNTPs）：DNA的構(gòu)建塊。（5）緩沖液：提供適宜的反應(yīng)環(huán)境。（6）鎂離子或其它必需的離子：通常作為DNA聚合酶的輔助因子。二、設(shè)定反應(yīng)混合物將所有材料混合在微量離心管中。混合物的總體積通常在20-50微升之間。
3. PCR程序（1）將混合物放入PCR機（熱循環(huán)儀）中，并設(shè)定程序。PCR程序通常包括以下階段：（2）初次變性：加熱至94-98°C，持續(xù)幾分鐘，使DNA雙鏈解開成單鏈。（3）循環(huán)步驟（通常進(jìn)行30-40次循環(huán)）：（4）變性階段：加熱至94-98°C，持續(xù)20-30秒，使DNA雙鏈解開。（5）退火階段：降溫至50-65°C，持續(xù)20-40秒，允許引物與模板DNA結(jié)合。（6）延伸階段：加熱至72°C，持續(xù)1分鐘每1千個堿基，以便DNA聚合酶合成新的DNA鏈。（7）后延伸：在72°C下持續(xù)5-10分鐘，確保所有可用的DNA模板都被復(fù)制。（8）保持階段：將溫度降至4-15°C，直到用戶準(zhǔn)備取出樣品。
PCR實驗的基本步驟：
DNA聚合酶是實驗室中常用的生物學(xué)酶之一，在PCR實驗中具有重要的作用。實驗室常用的DNA聚合酶，包括Taq聚合酶、Pfu聚合酶和Tth聚合酶。
一、產(chǎn)氣腸桿菌試劑·Taq聚合酶：
Taq聚合酶是由Thermus aquaticus細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶，在分子生物學(xué)研究中得到廣泛應(yīng)用。Taq聚合酶具有熱穩(wěn)定性，可以在高溫條件下保持活性，這是由于其來源于熱液生物，能夠存活和正常活動于高溫環(huán)境。這使得Taq聚合酶在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）中起到關(guān)鍵的作用。Taq聚合酶能夠按照DNA模板合成新的DNA鏈，因此在PCR中用于擴增目標(biāo)DNA片段。然而，Taq聚合酶缺乏3'-5'外切酶活性，導(dǎo)致其生成的PCR產(chǎn)物末端容易出現(xiàn)額外的腺嘌呤堿基。因此，在某些應(yīng)用中，需要使用具有外切酶活性的聚合酶。
二、Pfu聚合酶：
Pfu聚合酶是由Pyrococcus furiosus細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶相比，Pfu聚合酶具有更高的熱穩(wěn)定性和耐酶性。這使得Pfu聚合酶在高溫PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色，其高度穩(wěn)定的酶活性能夠確保PCR反應(yīng)的可靠性和準(zhǔn)確性。此外，Pfu聚合酶還具有3'-5'外切酶活性，可以修復(fù)并糾正PCR反應(yīng)中的腺嘌呤堿基誤配，有效防止誤差累積。因此，Pfu聚合酶適用于需要高度準(zhǔn)確的PCR擴增和DNA測序。
三、Tth聚合酶：
Tth聚合酶是由Thermus thermophilus HB8細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶和Pfu聚合酶不同，Tth聚合酶具有熱活性反轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄酶活性，可以將RNA模板合成相應(yīng)的DNA鏈。因此，Tth聚合酶在逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）中得到廣泛應(yīng)用，用于將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA，并通過增加熱活性酶來實現(xiàn)PCR擴增。此外，Tth聚合酶還具有一定的外切酶活性，可用于修復(fù)和校正PCR產(chǎn)物的末端。
實驗步驟：
一．樣品制備
1．PCR擴增并檢測。根據(jù)不同的引物挑選適合的退火溫度進(jìn)行PCR擴增。擴增產(chǎn)物用2-2.5%的瓊脂糖膠跑水平電泳檢測，上樣量3-5ul。PCR產(chǎn)物為10ng/nl左右為佳。
2．PCR產(chǎn)物與變性buffer混合。在干凈的PCR管底部加入5ul SSCP上樣緩沖液（變性緩沖液，同《分子克隆》中的測序緩沖液），然后在緩沖液中央加入PCR擴增產(chǎn)物。按照經(jīng)驗，擴增效果在瓊脂糖膠上能看出比較亮的帶的樣品加1ul，效果很好加0.5ul，如果不太好就適當(dāng)增加1.5、2或3不等，同時加大上樣緩沖液的量，比如加3ul的PCR產(chǎn)物，緩沖液加到8ul變性效果更好。
3．PCR產(chǎn)物變性。加好的樣品進(jìn)行離心，使樣品集中在管底。PCR儀上95℃變性10分鐘，立即取出PCR產(chǎn)物連同架子一同置于冰上靜置5min，以免變性的產(chǎn)物復(fù)性。
人乙腦病毒抗原(JEV-Ag)ELISA
豬轉(zhuǎn)錄因子AP-1 試劑盒 Pig anscription Factor/Activator Protein 1,AP-1 ELISA KIT
HumanAngiopoietin4,ANG-4ELISAKit 人血管生成素4(ANG-4)PCR檢測試劑盒
Humanininsicfactoraibody,IFAPCR檢測試劑盒人抗內(nèi)因子抗體(IFA)PCR檢測試劑盒
組織0酸二酯酶3(PDE3)活性熒光定量檢測試劑盒10次
HumanIerleukin13，IL-13ELISAKit人白介素13(IL-13)PCR檢測試劑盒
人發(fā)動蛋白2(DNM2)ELISA
小鼠S100-B蛋白(S100B)試劑盒 Mouse Protein S100-B,S100B ELISA kit
烯醇化酶(NSE)PCR檢測試劑盒 ， NSE ELISA Kit
Mousemonocytechemotacticprotein4,MCP-4PCR檢測試劑盒小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)PCR檢測試劑盒
ELISAKitGMP-140兔血漿α顆粒膜蛋白規(guī)格：48T/96T
FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)PCR檢測試劑盒
產(chǎn)氣腸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒HLA-A(Human leukocyte antigen A) ELISA Kit 人類白細(xì)胞抗原AMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CPSA(mouse monoclonal) 復(fù)合前列腺特異性抗原單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HCN3 /超極化激活環(huán)核苷酸門控通道蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml
HO-1 ELISA Kit 大鼠血紅素氧合酶1 96T
PDGFBB 英文名稱： 血小板源性生長因子BB抗體 0.1ml
Phospho-BRCA1 (Ser1387) 英文名稱： 0酸化癌易感基因1抗體 0.1ml
Anti-CPSA(mouse monoclonal) 復(fù)合前列腺特異性抗原單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
葉黃素127-40-2
1200元
產(chǎn)品名：葉黃素1,127-40-2,C40H56O2
110-馬兜鈴烯-9β-醇114339-94-5
1200元
產(chǎn)品名：馬兜鈴烯,9β-醇,C15H24O,114339-94-5
大鼠趨化因子(C-X-C基序)配體1(CXCL1)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名：大鼠趨化因子,CXCL1抗體,單克隆抗體
豬腫瘤壞死因子α(TNFa)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名：豬腫瘤壞死因子α,TNFa抗體,單克隆抗體
大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名：大鼠腦源性神經(jīng),BDNF抗體,單克隆抗體
大鼠離子化鈣結(jié)合適配分子1(IBA1)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名：大鼠離子化鈣結(jié)合,IBA1抗體,單克隆抗體
人肝素結(jié)合性表皮生長因子(HBEGF)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名：人肝素結(jié)合性表皮,HBEGF抗體,單克隆抗體
綿羊腫瘤壞死因子α(TNFa)單克隆抗體
3490元
產(chǎn)品名：綿羊腫瘤壞死因子,TNFa抗體,單克隆抗體