酶聯吸附測定原理
ELISA遵守以下3個核心原理：1)抗原或抗體能吸附于固相載體表面，并保持其學活性;2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其學和酶學活性;3)酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，可根據已知濃度的抗原或抗體的顏色反應的深淺繪制標準曲線并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。在ELISA中酶起到很關鍵的作用，常用于ELISA法的酶有辣根過氧化物酶，堿性磷酸酯酶等，其中尤以辣根過氧化物酶為多。酶結合物是酶與抗體或抗原, 半抗原在交聯劑作用下聯結的產物,它不僅具有抗體抗原特異的反應，還能催化酶促反應，顯示出生物放大作用。

ELISA試劑盒實驗、檢測法操作總結
對于ELISA試劑盒實驗操作，一些老師可謂是得心順手，操作起來很流暢，但對于一些實驗新手，大概只是背熟了理論概況，在實踐上，還是缺乏經驗，不知從何下手，今日，BUNSEN本生為幫助大家更好更順利的完成實驗，特對ELISA試劑盒實驗操作經驗進行了總結，一起來看看吧：
1. elisa實驗中每一個步驟都要認真對待，省去任何一個步驟或者不認真對待都可能導致elisa實驗的失敗
2. tip頭吸完后馬上從移液器上取下來，以免忙亂的時候又以同一tip汲取另一種試劑
3. elisa實驗開始前認真做個實驗計劃，做實驗時要專心致志，不要三心二意操作，必要時候進行記錄以便后期尋找出錯原因，在有部分實驗數據出來時。
4. 每次elisa實驗結束，也要及時做好實驗報告
5. 在加入試劑之前,把它混勻一下,以免放置時間過長濃度不均對實驗結果造成影響
6. elisa實驗結束后整理實驗臺，養成良好習慣
7. 做實驗一定要有計劃,這個不是為了出文章
8. elisa實驗經驗分享實驗過程中要詳細記錄實驗數據
9. 所有的東西都要標記好日期藥品名稱濃度等
10. 移液槍用完之后要歸到大計量的位置，防止時間導致彈簧失去彈性
11. 不使用酶標槍時不建議一直拿在手里，特別是里面還有液體的時候不可以倒過來
12. 做完實驗需洗手，離開實驗室前或進入實驗室前注意水，電是否安全
13. elisa試驗開始之前需查閱資料的時候，如若記要表明出處，方便日后查找
14. 一定要記著關水浴箱
15. 很多實驗室的槍頭是回收的

Elisa試劑盒有幾種檢測方法：
雙抗體夾心法
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。
2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。
4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
間接法
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜;
2.次日洗滌3次;
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;
4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌;
6.’后一遍用DDW洗滌。
其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

主營產品: 實驗室耗材,pcr耗材,elisa試劑盒,吸頭

本生(天津)健康科技有限公司是一家從事健康科技技術開發銷售的公司，公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業精神作為標準。 本生(天津)健康科技有限公司由具有行業背景和豐富市場經驗的業人士組成，于為生命科學研究域提供產品，為廣大科研工作者提供服務。 既能滿足研發類客戶對產品種類、包裝的特殊要求，也能滿足生產型企業從小試、中試到規模化生產各個階段的綜合需求。 產品涵蓋有熒光定量PCR耗材（八聯管,單管,96孔板,384孔板,封板膜,輔助器等），ELISA試劑盒，移液器吸嘴，離心管，凍存管，培養皿，培養板，培養瓶，吸頭，儀器及手套，培養基，抗體，血清，色譜耗材，針頭過濾器及實驗室常用耗材。 品種類超過萬種，廣泛應用于科研院校、中心實驗室、分子生物學等科研域。 本生一直視質量控制為企業的生命，追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業精神作為標準，以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創美好的未來。

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