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斑蝥探針法PCR鑒定試劑盒

更新時間1:2025-09-12 信息編號:1821q088qe25bf 舉報維權
斑蝥探針法PCR鑒定試劑盒
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斑蝥探針法PCR鑒定試劑盒
供應商 上海聯祖生物科技有限公司 店鋪
認證
報價 人民幣 4490.00元每盒
關鍵詞 PCR鑒定試劑盒,斑蝥探針法PCR,斑蝥探針法試劑盒
所在地 上海市嘉定區嘉羅公路1661
何君
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2年

產品詳細介紹

PCR檢測試劑盒產品簡介

PCR檢測試劑盒有效期一般為1年,這是指在適當的儲存溫度下。核酸擴增部分的試劑一般要貯存于-20℃下,產物檢測部分試劑則貯存于2-8℃。盡量避免反復凍融。上海

產品名稱:斑蝥探針法PCR鑒定試劑盒

英文名稱:Mylabris

產品貨號:LZ-P2612

分類:PCR檢測試劑盒

儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。

運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

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【結果分析條件設定】

u 基線(Baseline)設定:應選擇該次實驗指數擴增前所有樣本熒光信號比較穩定的一段區域(所有樣本熒光信號無較大波動),起始點(Start)應避開熒光采集起始階段的信號波動,終止點(End)應比早出現指數擴增的樣本Ct值減少1~3個循環,建議基線設為6~15。

u 閾值(Threshold)設定:將閾值線設定在剛好超過正常陰性質控品擴增曲線的高點。

【質控標準】

1.  陰性質控品的檢測結果應為陰性,無指數擴增期,Ct=40或無Ct;

2.   陽性質控品的檢測結果應為陽性,有明顯的指數擴增期,Ct值應小于等于35;

3.   以上要求需在一次實驗中同時滿足,否則該次實驗視為無效。

【結果判斷】

1.  陽性:有明顯的指數擴增期,且Ct<38;

2.可疑:有明顯的指數擴增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復核一次,若復核結果Ct<40且有指數擴增期,則判定為陽性,否則判定為陰性;

3.   陰性:無指數擴增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。

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PCR反應的特異性決定因素為:

  ?、僖锱c模板DNA特異正確的結合;

  ?、趬A基配對原則;

  ?、跿aq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

   ④靶基因的特異性與保守性。

斑蝥探針法PCR其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

PCR檢測步驟:

1、樣品處理

1)按照GB 4789.10-2016(或SN/T 1870-2016),取樣品25g(mL),加入到含有225mL 7.5% NaCl肉湯的無菌容器中均質,調節pH至6.8±0.2。

2)36±1℃培養18-24h。

注:也可參考其他地方標準進行樣品的前處理。

2、核酸提取

1)取40μL增菌液于裂解液管中,98℃或沸水浴10min。

2)冷卻至室溫,吸取上清備用或者置于-20℃保存。

3、反應體系配置

從試劑盒中取出SA預混液,充分融化,短暫離心,然后將陰性對照、樣品的DNA提取液、陽性對照各取5μL分別加入PCR管中,蓋好管蓋,短暫離心,立即進行PCR擴增反應。

4、斑蝥探針法試劑盒PCR擴增

PCR管置于PCR儀上,推薦反應程序設定如下:反應體系為25μL,在第二步每個循環60℃時檢測熒光信號,檢測通道選擇FAM。

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Anti-Haase 透明質酸酶/玻璃酸酶抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml


所屬分類:化學助劑/試劑盒

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