乙酰輔酶A羧化酶(ACC)試劑盒可見分光光度法說明書
可見分光光度法 50管/24樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
商品屬性:
產品名稱:乙酰輔酶A羧化酶(ACC)試劑盒可見分光光度法
貨號:LZ-S01190-A
規格 : 50管/24樣
測試方法:可見分光光度法
產品分類:脂肪酸代謝系列
發貨地:上海
測定意義:
ACC在生物體內催化乙酰輔酶A羧化生成丙二酰輔酶A,是脂肪酸和許多次生代謝產物合成的關鍵酶。ACC的活性在一定程度上決定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低。
測定原理:
ACC能夠催化乙酰輔酶A、NaHCO3和ATP生成丙二酰輔酶A、ATP和無機磷,通過鉬酸銨定磷法測定無機磷的增加量來測定ACC活性。
需自備的儀器和用品
分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:20mL×1 瓶, 4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;
試劑三:粉劑×1 瓶,-20℃保存;
試劑四:粉劑×1 瓶, 4℃保存。用時加入 25mL 蒸餾水,溶解后 4℃可保存一周。
試劑五:粉劑×1 瓶, 4℃保存。用時加入 25mL 蒸餾水,溶解后 4℃可保存一周。
試劑六:液體 25mL×1 瓶,室溫保存。
試劑七:10μmol/mL 標準磷貯備液 10mL×1 瓶,4℃保存。
樣本的前處理
1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
生化檢測試劑盒操作步驟:
一、?準備工具和環境?:確保操作臺面干凈、整潔,這是進行科學實驗的步。
?二、?仔細閱讀說明書?:這是使用試劑盒的基礎,說明書包含了所有必要的信息和操作指南。
三、樣本采集?:按照說明書的指導,正確采集樣本。不同類型的檢測可能需要不同類型的樣本,如血液、唾液或鼻涕等。杭州
?四、樣本混合?:將樣本與試劑小心混合,注意輕柔操作,避免產生泡沫,以確保檢測的準確性。
?五、?等待反應?:混合后,耐心等待試劑盒的反應,這個時間可以用來進行其他活動,但不要著急,因為好的結果值得等待。
六、結果判讀?:時間到后,仔細判讀結果。試劑盒通常會有明確的指示,告訴你如何根據顯示的線條或顏色來判斷結果。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。
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