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ATCC13932單核細(xì)胞增生李斯特菌0代菌株標(biāo)準(zhǔn)菌株

更新時(shí)間:2025-09-12 [舉報(bào)]

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ATCC(美國(guó)模式培養(yǎng)物集存庫(kù))標(biāo)準(zhǔn)菌株的存儲(chǔ)條件通常取決于菌株的特性,但一般常見(jiàn)的存儲(chǔ)方法和條件如下:

1. 冷凍保存:
- 液氮(-196℃):這是長(zhǎng)期保存菌株的常用方法,能大程度保持菌株的活性和穩(wěn)定性。
- 低溫冰箱(-80℃):也能有效保存菌株,但保存時(shí)間可能相對(duì)液氮較短。

2. 低溫冷藏:
- 一般在 2 - 8℃的冰箱中,適用于一些短期保存或?qū)囟纫蟛惶叩木辍?br />
在存儲(chǔ)菌株時(shí),通常會(huì)使用特定的保護(hù)劑,如甘油或脫脂牛奶等,以減少冷凍和復(fù)蘇過(guò)程對(duì)菌株的損傷。同時(shí),菌株的保存容器要經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌處理,并且做好標(biāo)記和記錄,包括菌株的名稱、編號(hào)、保存日期等信息。

ATCC(美國(guó)模式培養(yǎng)物集存庫(kù))標(biāo)準(zhǔn)菌株的質(zhì)量控制通常包括以下幾個(gè)方面:

1. 菌株的鑒定和確認(rèn):
- 通過(guò)形態(tài)學(xué)、生理生化特性、分子生物學(xué)等方法對(duì)菌株進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定,確保其符合 ATCC 提供的標(biāo)準(zhǔn)特征。
- 采用多種鑒定技術(shù)相互驗(yàn)證,以提高準(zhǔn)確性。

2. 純度檢測(cè):
- 檢查菌株是否受到其他微生物的污染,可通過(guò)平板劃線培養(yǎng)、顯微鏡觀察等方法。

3. 活力檢測(cè):
- 測(cè)定菌株的生長(zhǎng)曲線,了解其生長(zhǎng)速度和活力狀態(tài)。
- 進(jìn)行活菌計(jì)數(shù),評(píng)估活菌數(shù)量是否符合要求。

4. 穩(wěn)定性監(jiān)測(cè):
- 定期對(duì)菌株進(jìn)行傳代培養(yǎng),觀察其特性是否穩(wěn)定。
- 檢測(cè)關(guān)鍵的生物學(xué)特性和基因序列,以確認(rèn)在保存和傳代過(guò)程中未發(fā)生變異。

5. 保存條件控制:
- 嚴(yán)格按照 ATCC 推薦的保存方法和條件進(jìn)行保存,如低溫冷凍、凍干等。
- 定期檢查保存設(shè)備的性能和溫度等參數(shù)。

6. 來(lái)源追溯:
- 確保菌株的來(lái)源清晰可追溯,記錄其獲取、保存和使用的全過(guò)程。

7. 質(zhì)量檢測(cè)記錄:
- 建立詳細(xì)的質(zhì)量控制檢測(cè)記錄,包括檢測(cè)方法、結(jié)果、操作人員等信息。

8. 外部質(zhì)量評(píng)估:
- 參加外部質(zhì)量評(píng)估計(jì)劃或與其他實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行比對(duì),以驗(yàn)證質(zhì)量控制的有效性。

通過(guò)以上多方面的質(zhì)量控制措施,可以 ATCC 標(biāo)準(zhǔn)菌株的質(zhì)量和可靠性,為科研、檢測(cè)和生產(chǎn)等領(lǐng)域提供準(zhǔn)確和一致的標(biāo)準(zhǔn)參考。

評(píng)估復(fù)合細(xì)胞模型穩(wěn)定性可從細(xì)胞特性、功能、分子水平及環(huán)境因素等方面進(jìn)行,以下是具體的評(píng)估方法:
細(xì)胞特性評(píng)估
細(xì)胞形態(tài)觀察:通過(guò)顯微鏡定期觀察復(fù)合細(xì)胞模型中各種細(xì)胞的形態(tài)。如在腫瘤復(fù)合細(xì)胞模型中,觀察腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)是否保持典型特征,有無(wú)異常變化,若細(xì)胞形態(tài)穩(wěn)定,提示細(xì)胞模型在外觀上保持穩(wěn)定。
細(xì)胞生長(zhǎng)曲線測(cè)定:繪制復(fù)合細(xì)胞模型中各類細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線,連續(xù)監(jiān)測(cè)細(xì)胞在不同時(shí)間點(diǎn)的數(shù)量變化。若生長(zhǎng)曲線呈現(xiàn)穩(wěn)定的對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期、平臺(tái)期等特征,且多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似,說(shuō)明細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)穩(wěn)定,細(xì)胞模型在生長(zhǎng)特性方面較為穩(wěn)定。
細(xì)胞活力檢測(cè):采用臺(tái)盼藍(lán)染色、MTT 法、CCK - 8 法等檢測(cè)細(xì)胞活力。以 MTT 法為例,在相同培養(yǎng)條件下,定期檢測(cè)復(fù)合細(xì)胞模型中細(xì)胞的吸光度值,若吸光度值穩(wěn)定,表明細(xì)胞活力穩(wěn)定,細(xì)胞模型整體狀態(tài)穩(wěn)定。
細(xì)胞功能評(píng)估
特定功能檢測(cè):依據(jù)復(fù)合細(xì)胞模型的類型和研究目的,檢測(cè)細(xì)胞的特定功能。如在肝臟復(fù)合細(xì)胞模型中,檢測(cè)肝細(xì)胞的代謝功能,包括對(duì)藥物、毒素的代謝轉(zhuǎn)化能力;在神經(jīng)細(xì)胞復(fù)合模型中,檢測(cè)神經(jīng)元的電生理活動(dòng),如動(dòng)作電位的發(fā)放等,若這些功能指標(biāo)在多次檢測(cè)中保持穩(wěn)定,說(shuō)明細(xì)胞模型的功能穩(wěn)定。
細(xì)胞間相互作用監(jiān)測(cè):觀察復(fù)合細(xì)胞模型中不同細(xì)胞間的相互作用。例如在腫瘤微環(huán)境復(fù)合細(xì)胞模型中,通過(guò)熒光染色等方法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞之間的信號(hào)傳導(dǎo)分子表達(dá)情況,若細(xì)胞間相互作用的相關(guān)指標(biāo)穩(wěn)定,表明細(xì)胞模型中細(xì)胞間的關(guān)系和功能穩(wěn)定。
分子水平評(píng)估
基因表達(dá)分析:運(yùn)用實(shí)時(shí)定量 PCR、基因芯片等技術(shù)檢測(cè)與細(xì)胞功能、表型相關(guān)的關(guān)鍵基因表達(dá)水平。在心肌細(xì)胞復(fù)合模型中,檢測(cè)心肌特異性基因如肌鈣蛋白、肌球蛋白等的表達(dá),若這些基因的表達(dá)量在一定范圍內(nèi)波動(dòng)且保持相對(duì)穩(wěn)定,說(shuō)明細(xì)胞模型在基因表達(dá)層面穩(wěn)定。
蛋白質(zhì)表達(dá)檢測(cè):采用 Western blotting、組化等方法檢測(cè)關(guān)鍵蛋白質(zhì)的表達(dá)和定位。在皮膚復(fù)合細(xì)胞模型中,檢測(cè)角蛋白、膠原蛋白等蛋白質(zhì)的表達(dá)情況,若蛋白質(zhì)表達(dá)水平和定位穩(wěn)定,反映出細(xì)胞模型在蛋白質(zhì)水平的穩(wěn)定性。
環(huán)境因素評(píng)估
培養(yǎng)條件穩(wěn)定性:保持培養(yǎng)條件的一致性,包括培養(yǎng)基成分、溫度、濕度、氣體環(huán)境等。定期檢測(cè)培養(yǎng)箱的溫度、二氧化碳濃度等參數(shù),確保其在設(shè)定范圍內(nèi)波動(dòng),同時(shí)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基的 pH 值、營(yíng)養(yǎng)成分含量等,若培養(yǎng)條件穩(wěn)定,有助于維持復(fù)合細(xì)胞模型的穩(wěn)定性。
批次間一致性:對(duì)于多次構(gòu)建的復(fù)合細(xì)胞模型,進(jìn)行批次間的比較分析。檢測(cè)不同批次細(xì)胞模型的細(xì)胞特性、功能、分子水平等指標(biāo),若各批次間的差異較小,說(shuō)明細(xì)胞模型具有良好的批次間穩(wěn)定性,可重復(fù)性高。

標(biāo)簽:ATCC9610小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌ATCC16404巴西曲霉
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