半胱氨酰亞砜裂解酶（CSL)試劑盒微量法說明書
微量法 100管/48樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
商品屬性：
產品名稱：半胱氨酰亞砜裂解酶（CSL)試劑盒微量法
貨號：LZ-S01115
規格 : 100管/48樣
測試方法:微量法
產品分類：氨基酸代謝系列
發貨地：上海
測定意義:
半胱氨酰亞砜裂解酶（CSL）廣泛存在于百合科蔥屬(如大蒜和洋蔥)，十字花科蕓薹屬
(如卷心菜，菜花，西蘭花)，以及豆科中的合金歡屬中，并通常被稱為蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰轉肽酶和半胱氨酸亞砜裂解酶的作用下轉化成香菇精，以及產生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是內源性甲醛生成的關鍵酶之一，測定CSL活性對于研究食品安全具有重要意義。
測定原理:
CSL催化S-甲基-L-半胱氨酸亞砜反應產生丙酮酸，與2,4-二硝基苯肼反應，在堿性條件下顯棕紅色，在510nm下有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器
天平、研缽、離心機、酶標儀、96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1 瓶，4℃避光保存，臨用前加入 2mL 水溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保
存；
試劑二：粉劑×1 瓶，-20℃避光保存，臨用前加入 10mL 水溶解，用不完的試劑分裝后-20℃
保存；
試劑三：液體 15mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 6mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑五：液體 30mL×1 瓶，4℃保存。
NAD+和 NADH 的提取:
1 血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提取：按照血清（漿）體積（mL）：酸性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 酸性提取液），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。NADH 的提取：按照血清（漿）體積（mL）：堿性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 堿性提取液），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
2 組織中 NAD+和 NADH 的提取：NAD+的提取：按照組織質量（g）：酸性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1g組織，加入 1mL 酸性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
NADH 的提取：按照組織質量（g）：堿性提取液體積（mL）為 1：5~10 的比例（建議取約 0.1g
組織，加入 1mL 堿性提取液），冰浴研磨，60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
3 細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取：NAD+的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：酸性提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 酸性提取液），超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。NADH 的提取：先收集細胞或細菌到離心管內，棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）：堿性提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 堿性提取液），超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次），60℃水浴 5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min；取 500μL 上清液，加入 500μL 酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
生化檢測試劑盒操作步驟：
一、?準備工具和環境?：確保操作臺面干凈、整潔，這是進行科學實驗的步。
?二、?仔細閱讀說明書?：這是使用試劑盒的基礎，說明書包含了所有必要的信息和操作指南。
三、樣本采集?：按照說明書的指導，正確采集樣本。不同類型的檢測可能需要不同類型的樣本，如血液、唾液或鼻涕等。
?四、樣本混合?：將樣本與試劑小心混合，注意輕柔操作，避免產生泡沫，以確保檢測的準確性。
?五、?等待反應?：混合后，耐心等待試劑盒的反應，這個時間可以用來進行其他活動，但不要著急，因為好的結果值得等待。
六、結果判讀?：時間到后，仔細判讀結果。試劑盒通常會有明確的指示，告訴你如何根據顯示的線條或顏色來判斷結果。
公司正在出售的產品：
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PorcineIerferonγ,IFN-γELISA試劑盒豬γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規格：96T/48T
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。
