產(chǎn)品名稱：乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基顆粒

貨號(hào)：LZ-PYJ3222

英文名稱：Lactose Bile Broth

產(chǎn)品規(guī)格：300ml/袋*10

用于大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌的測(cè)定

成分（g/L）

蛋白胨 20.0g

牛膽鹽　5.0g

乳糖 10.0g

溴紫　0.01g

PH值 7.4±0.2

培養(yǎng)基顆粒質(zhì)量控制和典型特征

在36±1℃培養(yǎng)24±2小時(shí)，大腸菌群、大腸桿菌和發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性細(xì)菌產(chǎn)生氣體，在小倒管內(nèi)有氣泡；其它細(xì)菌無氣泡。

主要包括：

計(jì)算—稱量—溶解—調(diào)pH—分裝—滅菌——倒平板等。

計(jì)算：，根據(jù)配方計(jì)算各種營(yíng)養(yǎng)成分的用量。

稱量：使用電子天平準(zhǔn)確稱取所需，遵循由含量低到含量高的稱量原則。

溶解：將稱好的成分放入相應(yīng)玻璃容器中，加入所需量的水，加熱使其完全溶解。對(duì)于液體培養(yǎng)基，建議使用純化水。若配制固體培養(yǎng)基，則需稱取適量的瓊脂放進(jìn)已稱量好的培養(yǎng)基中，繼續(xù)加熱至瓊脂全部溶解。

調(diào)pH值：待培養(yǎng)基稍冷卻后，按配方要求調(diào)整pH值。使用10% NaOH溶液（或10% HCl溶液）調(diào)整所配培養(yǎng)基的pH。加堿（或酸）溶液時(shí)，應(yīng)邊滴加邊攪拌，直至后調(diào)至要求的pH值。

分裝：根據(jù)需要將培養(yǎng)基分裝于不同的三角燒瓶、試管等。分裝的量不宜超過容器的2/3以免滅菌時(shí)外溢。分裝量根據(jù)使用目的和要求決定，但定量分裝，便于應(yīng)用。

滅菌：應(yīng)按培養(yǎng)基配方中規(guī)定的條件及時(shí)進(jìn)行滅菌。普通培養(yǎng)基采用121℃、15min高壓濕熱滅菌法，以滅菌效果和不損傷培養(yǎng)基的有效成份。

倒平板：滅菌后取出的固體培養(yǎng)基，根據(jù)需要可將試管立即斜放，冷凝后即成斜面培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基冷卻后可直接根據(jù)需要接進(jìn)菌種。

此外，還包括一些注意事項(xiàng)和操作細(xì)節(jié)，如使用度1/100的電子天平稱取、避免使用銅或鐵的容器溶化培養(yǎng)基、調(diào)整pH時(shí)考慮高壓滅菌后的pH變化等。

1、乳糖膽鹽發(fā)酵上海準(zhǔn)備好干粉培養(yǎng)基、三角瓶、藥勺、無菌平皿、油性筆等。在瓶身上標(biāo)注好培養(yǎng)基的

相關(guān)信息。

2、將三角瓶置于電子天平上，調(diào)零。按照需要用量，用藥勺把干粉培養(yǎng)基添加到三角瓶中。

3、稱量之后及時(shí)蓋上培養(yǎng)基瓶蓋，擰緊。用量筒量取適量的蒸餾水或者去離子水。

4、先加入小部分水以濕潤(rùn)干粉，避免粉塵揚(yáng)起。再加入剩余的水量。充分搖勻。

5、將培養(yǎng)基加熱煮至沸騰三次，應(yīng)可見溶液澄清透亮，無明顯瓊脂顆粒掛壁，分層等現(xiàn)象。

6、塞上透氣硅膠塞，包上牛皮紙或者報(bào)紙，包扎好。放入高壓滅菌鍋中滅菌。（按需設(shè)定滅

菌溫度、時(shí)間）

7、暫時(shí)不使用的培養(yǎng)基，可以放入50℃烘箱或者水浴中保溫。倒平板時(shí)，在超凈工作臺(tái)或

生物安全柜中準(zhǔn)備好無菌平皿、記號(hào)筆等。

8、拆開包裝后，將無菌培養(yǎng)皿倒置，在底部邊緣寫上平板相關(guān)信息。

9、將標(biāo)記好的無菌平皿翻轉(zhuǎn)過來，當(dāng)培養(yǎng)基溫度下降到50℃左右時(shí)，傾倒培養(yǎng)基。

10、倒完后可輕輕圓周搖晃平板三圈，使平板邊緣整齊。將平板鋪開可加速瓊脂冷卻凝固。

11、使用之前，將平板倒置于無菌實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的烘箱中，55℃、15 分鐘。烘干平板表面水分。

12、將暫時(shí)不使用的平板用報(bào)紙包成筒狀，用記號(hào)筆標(biāo)清楚平板的種類、配制日期。

13、然后放進(jìn)2-8℃的冰箱中保存。用時(shí)取出放置室溫下平衡，使用前50℃烘箱烘10 分鐘。

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