山梨醇脫氫酶試劑盒

測定意義：                           

SH（EC 1.1.1.14）催化山梨醇脫氫生成果糖，是調控生物體內山梨醇含量的關健酶之一。

測定原理：

SH催化山梨醇脫氫生成果糖，同時還原NAD+生成NADH，測定340nm吸光度增加速率可以計算SH活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

注   意 ：
正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

粗酶液提取：

1、細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

3、血清（漿）樣品：直接檢測。

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