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果膠酯酶試劑盒/果膠甲酯酶試劑盒NaOH滴定法

更新時間:2025-09-09 [舉報]

果膠酯酶試劑盒/果膠甲酯酶試劑盒NaOH滴定法說明書

NaOH滴定法 50管/48樣  

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

商品屬性:

產品名稱:果膠酯酶試劑盒/果膠甲酯酶試劑盒NaOH滴定法

貨號:LZ-S01402

規格 : 50管/48樣

測試方法:NaOH滴定法

產品分類:光合作用系列

發貨地:上海

測定意義:

果膠酯酶, 屬果膠酶系,亦稱為果膠酶、果膠甲酯酶、果膠氧化酶。催化水解果膠長鏈上的甲氧酯水解產生小分子物質果膠酸和甲醇, 從而增加果膠在水中的溶解度。廣泛存在于高等植物和可以降解細胞壁的細菌和真菌中,起內源調控植物細胞壁上及細胞之間果膠含量的作用,在食品工業中具有及其重要的作用和開發前景。

8.jpg

測定原理:

果膠酯酶催化水解果膠分子釋放H+,使反應體系的pH下降,用堿液維持體系的pH始終保持在7.8(酚酞指示劑維持在粉紅色),通過堿消耗的NaOH量反映果膠酯酶的活性。

需自備的儀器和用品:

天平、研缽、離心機、烘箱。

試劑的組成和配制:

提取液:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前每瓶加雙蒸水 100mL 充分溶解。(如有不溶現象,磁

力攪拌器 40℃加熱,或者超聲波清洗器超聲至完全溶解)

試劑一:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加少量蒸餾水溶解,然后轉入 500mL 容量瓶,用蒸

餾水定容至 500mL。(磁力攪拌器 40℃加熱溶解 3 小時左右至完全溶解,提前制備)

試劑二:液體×1 瓶,4℃保存。易揮發,使用后及時用封口膜封口。

試劑三:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:用蒸餾水將試劑三稀釋 5 倍,得試劑四。

生化檢測試劑盒操作步驟:

一、?準備工具和環境?:確保操作臺面干凈、整潔,這是進行科學實驗的步。

?二、?仔細閱讀說明書?:這是使用試劑盒的基礎,說明書包含了所有必要的信息和操作指南。

三、樣本采集?:按照說明書的指導,正確采集樣本。不同類型的檢測可能需要不同類型的樣本,如血液、唾液或鼻涕等。

?四、樣本混合?:將樣本與試劑小心混合,注意輕柔操作,避免產生泡沫,以確保檢測的準確性。

?五、?等待反應?:混合后,耐心等待試劑盒的反應,這個時間可以用來進行其他活動,但不要著急,因為好的結果值得等待。

六、結果判讀?:時間到后,仔細判讀結果。試劑盒通常會有明確的指示,告訴你如何根據顯示的線條或顏色來判斷結果。 

NAD+和 NADH 的提取:

1 血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取NAD+的提取:按照血清(漿)體積(mL):酸性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1mL 血清(漿),加入 1mL 酸性提取液),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。NADH 的提取:按照血清(漿)體積(mL):堿性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1mL 血清(漿),加入 1mL 堿性提取液),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

2 組織中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1g組織,加入 1mL 酸性提取液),冰浴研磨,60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

NADH 的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取約 0.1g

組織,加入 1mL 堿性提取液),冰浴研磨,60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

3 細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 酸性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。NADH 的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿性提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 堿性提取液),超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次),60℃水浴 5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心 10min,取上清,置冰上待測。3.jpg

注意事項:

①加入試劑的順序應一致,以所有反應板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。

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IL1B重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標簽) Protein

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基質金屬蛋白酶3抑制劑(NNGH)500微升

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標簽:果膠酯酶試劑盒試劑盒
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