GM-CSF Ab粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體ELISA試劑盒

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實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>

本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中GM-CSF Ab粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體的含量。

實(shí)驗(yàn)原理：

上海試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被GM-CSF Ab粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中GM-CSF Ab粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度

試劑盒組成：

操作步驟：

GM-CSF Ab 試劑盒方法一　用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:

1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個(gè)聚板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌，下同)。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。

3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M0.05ml。

6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。

　　粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞試劑盒方法二　用于檢測(cè)未知抗體的間接法：　　　

　　用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。

注意事項(xiàng)：

1.　正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說(shuō)明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

2.　在酶聯(lián)ELISA試劑盒中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:

(1)　固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚、聚、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

　　（2) 包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg／ml等)進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1～10μg／ml。

(3)　酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：用直接ELISA檢測(cè)試劑盒法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。

(4)　酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。

公司正在出售的產(chǎn)品：

5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin 0.5mg5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 3a) 5-羥色胺受體3抗原

同源盒蛋白HOXC9抗體

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HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta 0.5mgHSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta) 熱休克蛋白-90β (抗原)

NTNG1重組人 NTNG1 / Netrin-G1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha 0.5mgIL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha ) 白介素1α抗原

小鼠生長(zhǎng)激素(GH)試劑盒 Mouse growth hormone,GH ELISA KIT

Humanβ-lactamaseELISA試劑盒人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

MouseHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISA試劑盒小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子21抗體

FGFR1OP重組人 FGFR1OP / FOP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CDK2 (Cyclin-Dependent Kinase 2 0.5mgCDK2 (Cyclin-Dependent Kinase 2) 周期素依賴激酶2(抗原)

共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣2抗體

依賴性脯氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)PROT抗體

SIGIRR重組人 SIGIRR / TIR8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

載玻片細(xì)胞RyR受體蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20

HumaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISAkit 人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體  Anti-TORC1  WB IHC-P IHC-F IF  100ul

Goat Anti-Mouse IgG(H+L)-Cy3  進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

神經(jīng)降壓素受體1抗體

Ratbrain-gpeptides,BGP/GehrelinELISAKit大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶1(IDO1)試劑盒 Mouse Indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1 ELISA kit

GM-CSF Ab粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體ELISA試劑盒內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗體